УДК 616.327.2

Е.М. ПОКРОВСКАЯ^1, 2, С.В. ХАЛИУЛЛИНА^1, 3, Э.Ф. МАННАНОВА^1, 2

 ¹Казанский Федеральный университет, г. Казань

²Казанская государственная медицинская академия — филиал РМАНПО МЗ РФ, г. Казань

³Казанский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Казань

Контактная информация:

Покровская Елена Михайловна — д.м.н., заведующая кафедрой оториноларингологии и офтальмологии, доцент; ассистент кафедры оториноларингологии

Адрес: 20012, г. Казань, ул. Карла Маркса, 76, тел.: +7-917-263-90-96, e—mail: epokrunia@inbox.ru

В статье представлены результаты исследований уровня α-дефензинов при хронических аденоидитах у детей.

Цель исследования — оценка состояния врожденного мукозального иммунитета при хроническом аденоидите.

Материал и методы. Обследован 151 пациент с хроническим аденоидитом в возрасте от 3 до 7 лет. Концентрацию α-дефензина определяли, используя набор HBT Human HNP 1-3 ELISA, предназначенный для количественного определения дефензинов нейтрофилов в смешанной слюне.

Результаты. Проведенный анализ показал, что у детей с хроническими аденоидитами в обеих группах имело место статистически значимое (р<0,05) повышение концентрации дефензинов в слюне, по сравнению с возрастной нормой.

Ключевые слова: хронический аденоидит, мукозальный иммунитет, α-дефензины, дети.

 (Для цитирования: Покровская Е.М., Халиуллина С.В., Маннанова Э.Ф. Особенности врожденного иммунитета у детей с хронической инфекцией носоглотки. Практическая медицина. 2023. Т. , № , С.)

 

E.M. POKROVSKAYA^1, 2, S.V. KHALIULLINA^1, 3, E.F. MANNANOVA^1, 2

 ¹Kazan Federal University, Kazan

²KSMA — Branch Campus of the FSBEI FPE RMACPE MOH, Kazan

³Kazan State Medical University, Kazan

 Features of innate immunity in children with chronic nasopharyngeal infection

 Contact details:

Pokrovskaya E.M. — MD, Associate Professor, Head of the Department of Otolaryngology and Ophthalmology; Assistant Lecture of the Department of Otolaryngology

Address: 76 Karl Marx St., Kazan, Russian Federation, 420012, tel.: +7-917-263-90-96, e-mail: epokrunia@inbox.r

 The article presents the results of studies of α-defensin level in chronic adenoiditis in children.

The purpose — to assess the state of innate mucosal immunity in chronic adenoiditis.

Material and methods. We examined 151 patients with chronic adenoiditis aged 3 to 7 years. Concentration of α-defensin was determined using the HBT Human HNP 1-3 ELISA kit, designed for the quantification of neutrophil defensins in mixed saliva.

Results. The analysis showed that in both groups of children with chronic adenoiditis there was a statistically significant (p < 0.05) increase in the concentration of defensins in saliva compared to the age norm.

Key words: chronic adenoiditis, mucosal immunity, α-defensins, children.

(For citation: Pokrovskaya E.M., Khaliullina S.V., Mannanova E.F. Features of innate immunity in children with chronic nasopharyngeal infection. Practical medicine. 2023. Vol. , № , P.)

 

Учитывая высокую распространенность хронического аденоидита в детской популяции, очевидным становится научный интерес к механизмам мукозального иммунитета верхних дыхательных путей у детей.

Реакция врожденного иммунного ответа на внедрение патогенного возбудителя осуществляется посредством неспецифических механизмов защиты. Нейтрофилы и макрофаги, мигрирующие из кровеносного русла, захватывают и фагоцитируют микроорганизмы, нейтрализуют их за счет секреторной дегрануляции с высвобождением цитотоксических протеолитических ферментов и антимикробных пептидов, продукции активных форм кислорода и оксида азота, а также путем образования нейтрофильных внеклеточных ловушек [2].

Антимикробные пептиды — α- и β-дефензины представляют собой небольшие катионные пептиды, результатом деятельности которых является нарушение проницаемости мембран микроорганизмов с образованием порообразных разрывов, что приводит к мембранной деполяризации и лизису последних. Описаны 6 групп α-дефензинов (HNP, human neutrophils peptides). Дефензины с 1 по 4 группы (HNP-1–4) образуются только в нейтрофилах, а остальные продуцируются клетками Пеннета. Все нейтрофильные белки (HNP) организма человека выделяются из азурофильных гранул нейтрофилов в результате их активации. У здорового человека HNP-1–3 в наибольшем количестве присутствуют в слюне (около 99%). Количество дефензинов составляет 3–5 мг на миллион нейтрофилов человека [3–5]. В исследованиях Furci L. с соавт. было доказано, что выделение α-дефензинов нейтрофилами — это быстрый и универсальный механизм защиты организма от большинства вирусов и бактерий [6].

Таким образом, актуальной является задача изучения активности антимикробных пептидов — одной из важнейших составляющих врожденного иммунитета, обеспечивающей защиту против патогенов при хронической патологии глоточной миндалины.

Цель исследования — определение уровня α-дефензинов 1–3 как показателя неспецифической защиты слизистых оболочек верхних отделов дыхательных путей у детей с хроническим аденоидитом.

Материал и методы.

На базе медицинского центра «Здоровье семьи» (г. Казань), в период с 2018 по 2022 гг. было проведено обследование 151 ребенка в возрасте от 3 до 7 лет с диагнозом «Хронический аденоидит». Пациентов разделили на 2 группы: 73 ребенка вошли в первую группу, это были дети с установленным диагнозом хронический аденоидит с «невыраженной» гипертрофией глоточной миндалины, и 78 пациентов с диагнозом «Хронический аденоидит с гипертрофией глоточной миндалины 3 степени» составили вторую группу.

Лабораторные методы обследования включали в себя исследования концентрации α-дефензина в слюне. Для сбора слюны, транспортировки и первичной обработки образца слюны использовали контейнеры Salivette^®. Забор слюны проводили утром с 9.00 до 10.00 до приема пищи. Перед сбором слюны пациент полоскал ротовую полость 100 мл теплого физиологического раствора. Затем укладывали впитывающий валик в рот, направляя его в защечный мешок, оставляя там на 2 мин без жевательных движений, после чего тампон помещали в контейнер Salivette^® и транспортировали в лабораторию. Концентрацию α-дефензина определяли, используя набор HBT Human HNP 1-3 ELISA, предназначенный для количественного определения дефензинов нейтрофилов в смешанной слюне. Определение содержания растворимых дефензинов (HNP 1–3) основано на «сэндвич» методе твердофазного иммуноферментного анализа. Диапазон измерения тест системы составляет 156–10 000 нг/мл.

В специализированной литературе отражены показатели уровней дефензинов HNP 1–3 у здоровых людей лишь с 14-летнего возраста, у которых в ротовой жидкости α-дефензины 1–3 в среднем составляют от 297 до 448 нг/мл [7, 8]. По этой причине мы использовали в качестве контроля данные 15 условно здоровых детей в возрасте 3–7 лет.

Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета статистических программ Statistica 8.0. В качестве меры центральной тенденции рассчитывали медиану (Ме), из мер рассеяния — межквартильный размах (значения 25–75 процентилей, МКР). Оценку статистической значимости различий между группами проводили с использованием U-критерия Манна — Уитни.

Результаты и обсуждение

Проведенный анализ показал, что у детей с хроническими аденоидитами в обеих группах имело место статистически значимое (р < 0,05) повышение концентрации дефензинов в слюне, по сравнению с возрастной нормой, которая составила 645 нг/мл (табл.1).

 Таблица 1. Содержание α-дефензинов (HNP1-3) (нг/мл) в слюне

Table 1. Content of α-defensins (HNP1-3) (ng/ml) in saliva

	Группа 1	Группа 2	Группа контроля
Медиана	5000 МКР 4940–5000	4830 МКР 2790–5000	645 МКР 360–840
р1-2 = 0,648; р1-3 = 0,039; р2-3 = 0,044

Показатели превышали норму практически в 7 раз, что свидетельствует о значительной активации системы врожденного антимикробного иммунитета у детей с хроническим аденоидитом. Тогда как статистически значимых отличий между группами 1 и 2 выявлено не было.

Выводы

Таким образом, уровень дефензинов HNP 1-3 при хронических аденоидитах у детей с рецидивирующими респираторными заболеваниями повышен, по сравнению с возрастной нормой (p < 0,05), практически в 7 раз, что свидетельствует о значительной активации системы врожденного антимикробного иммунитета. По-видимому, это можно объяснить увеличением их синтеза нейтрофилами, рекрутированными в очаг воспаления в ответ на избыточную антигенную стимуляцию, усилением экспрессии провоспалительных цитокинов, приводящих к активацим систем врожденного и клеточного иммунитета и т. д. Возможно, дефензины представляют собой один из механизмов «сдерживания» инфекции, который препятствует ее генерализации, несмотря на наличие длительно существующего хронического очага. Уровень дефензинов в слюне детей с хроническими аденоидитами, по-видимому, не зависит от степени гипертрофии глоточной миндалины.

Покровская Е.М.

https://orcid.org/0000-0001-9437-4895

Халиуллина С.В.

https://orcid.org/0000-0001-7763-5512

Маннанова Э.Ф.

https://orcid.org/0000-0002-6085-1275

 Литература

1. Moutsopoulos N.M., Moutsopoulos H.M. The oral mucosa: A barrier site participating in tissue-specific and systemic immunity // Oral Dis. — 2018. — Vol. 24 (1–2). — Р. 22–25. DOI: 10.1111/odi.12729
2. Rosales C. Neutrophil: A Cell with Many Roles in Inflammation or Several Cell Types? // Front Physiol. — 2018. — № 9. — Р. 113. DOI: 10.3389/fphys.2018.00113
3. Вавилова Т.П., Деркачева Н.И., Островская И.Г. Антимикробные пептиды — многофункциональная защита тканей полости рта // Российская стоматология. — 2015. — № 3. — С. 3–12. DOI: 10.33920/med-08-2212-01
4. Kamekura R., Imai R., Takano K., Yamashita K., Jitsukawa S. et al. Expression and localization of human defensins in palatine tonsils // Adv. Otorhinolaryngol. — 2016. — Vol. 77. — Р. 112–118. DOI: 10.1159/000441888
5. Mamchur V.I., Leviev A.E. Defensins are endogenous peptides with anti-infectious and antitumor properties // Tavricheskiy medikobiologicheskiy vestnik. — 2012. — Vol. 15 (2). — Р. 315–321. DOI: 10.1002/9780470514344.ch16
6. Furci L., Sironi F., Tolazzi M., Vassena L., Lusso P. Alpha-defensins block the early steps of HIV-1 infection: interference with the binding of gp120 to CD4 // Blood. — 2007. — Vol. 109 (7). — Р. 2928–2935. DOI: 10.1182/blood-2006-05-024489
7. Блашкова С.Л., Мустафин И.Г., Халиуллина Г.Р. Роль эндогенных антимикробных пептидов в развитии воспалительных заболеваний пародонта у пациентов, находящихся на ортодонтическом лечении // Фундаментальные исследования. — 2014. — № 4-3. — С. 461–465. DOI: 10.51620/0869-2084-2021-66-7-422-427
8. Садыков М.И., Шумский А.В., Нестеров А.М., Нестеров Г.М. Оценка состояния местного иммунитета полости рта у пациентов с полным отсутствием зубов // Современные проблемы науки и образования. — 2015. — № 5. — URL: www.scienceeducation.ru/128-22258

REFERENCES

1. Moutsopoulos N.M., Moutsopoulos H.M. The oral mucosa: A barrier site participating in tissue-specific and systemic immunity. Oral Dis, 2018, vol. 24 (1–2), rr. 22–25. DOI: 10.1111/odi.12729
2. Rosales C. Neutrophil: A Cell with Many Roles in Inflammation or Several Cell Types? Front Physiol, 2018, no. 9, r. 113. DOI: 10.3389/fphys.2018.00113
3. Vavilova T.P., Derkacheva N.I., Ostrovskaya I.G. Antimicrobial peptides — multifunctional protection of oral tissues. Rossiyskaya stomatologiya, 2015, no. 3, pp. 3–12 (in Russ.). DOI: 10.33920/med-08-2212-01
4. Kamekura R., Imai R., Takano K., Yamashita K., Jitsukawa S. et al. Expression and localization of human defensins in palatine tonsils. Adv. Otorhinolaryngol, 2016, vol. 77, rr. 112–118. DOI: 10.1159/000441888
5. Mamchur V.I., Leviev A.E. Defensins are endogenous peptides with anti-infectious and antitumor properties. Tavricheskiy medikobiologicheskiy vestnik, 2012, vol. 15 (2), rr. 315–321. DOI: 10.1002/9780470514344.ch16
6. Furci L., Sironi F., Tolazzi M., Vassena L., Lusso P. Alpha-defensins block the early steps of HIV-1 infection: interference with the binding of gp120 to CD4. Blood, 2007, vol. 109 (7), rr. 2928–2935. DOI: 10.1182/blood-2006-05-024489
7. Blashkova S.L., Mustafin I.G., Khaliullina G.R. The role of endogenous antimicrobial peptides in the development of inflammatory periodontal diseases in patients undergoing orthodontic treatment. Fundamental’nye issledovaniya, 2014, no. 4-3, pp. 461–465 (in Russ.). DOI: 10.51620/0869-2084-2021-66-7-422-427
8. Sadykov M.I., Shumskiy A.V., Nesterov A.M., Nesterov G.M. Assessment of the state of local immunity of the oral cavity in patients with complete absence of teeth. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya, 2015, no. 5 (in Russ.), available at: www.scienceeducation.ru/128-22258