УДК 617.7-089.844

 Ж.Х. САНЕЕВА, И.И. КАГАН

¹Оренбургский филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова МЗ РФ, 460047, г. Оренбург, ул. Салмышская, д. 17

²Оренбургский государственный медицинский университет МЗ РФ, 460000, г. Оренбург, ул. Советская, д. 6

Санеева Жанна Хазиахметовна — врач-офтальмохирург, тел. (3532) 65-06-82, e-mail: nauka@ofmntk.ru

Каган Илья Иосифович — доктор медицинских наук, профессор кафедры клинической анатомии и оперативной хирургии, тел. (3532) 77-93-86, e-mail: k_topanatom@orgma.ru

Учитывая, что морфометрические параметры глаза кролика близки и сопоставимы с параметрами глаза человека, наиболее часто эти животные являются объектом экспериментальных исследований. Полученная модель субатрофии глазного яблока послужила основой для оценки изменений глазного яблока после применения биологического материала «Аллоплант» для реваскуляризации ресничного тела. Выявленные анатомические изменения ресничного тела кролика после применения Аллопланта свидетельствуют о его позитивном влиянии в виде стабилизации размеров глазного яблока и внутриглазного давления. Полученные результаты исследования могут быть использованы для обоснования нового способа хирургического лечения субатрофии глазного яблока с учетом развивающихся морфофункциональных процессов.

Ключевые слова: субатрофия, модель, реваскуляризация, Аллоплант, гистотопограмма.

 

Zh.Kh. SANEEVA, I.I. KAGAN

¹Orenburg branch of the S. Fyodorov Eye Microsurgery Federal State Institution, 17 Salmyshskaya Str., Orenburg, Russian Federation, 460047

²Orenburg State Medical University, 6 Sovetskaya Str., Orenburg, Russian Federation, 460000

Morphological analysis of «Alloplant» implanted in the eyeball wall under the conditions of its experimental subatrophy

Saneeva Zh.Kh. — ophthalmosurgeon, tel. (3532) 65-06-82, e-mail: nauka@ofmntk.ru

Kagan I.I. — D. Med. Sc., Professor of the Department of Clinical Anatomy and Operative Surgery, tel. (3532) 77-93-86, e-mail: k_topanatom@orgma.ru

Taking into account that the morphometric parameters of a rabbit’s eye are close and comparable to the parameters of a human eye, these animals most often become the object of experimental research. The obtained model of eyeball subatrophy served as the basis for assessing the changes in the eyeball after applying the biological material «Alloplant» for revascularization of the ciliary body. The revealed anatomical changes of the rabbit’s ciliated body followed by the application of Alloplant indicate its positive effect in the form of stabilization of the eyeball size and intraocular pressure. The obtained results of the study can be used to substantiate the new method of surgical treatment of the eyeball subatrophy, taking into account the developing morphofunctional processes.

Keywords: subatrophy, model, revascularization, Alloplant, histotopogram.

 

Основным подопытным животным в офтальмологии является кролик. Источники кровоснабжения зрительного анализатора у кролика и других лабораторных животных изучены разными авторами [1-4]. Изменения кровеносного русла глазного яблока кролика при экспериментальном нарушении кровоснабжения описаны Л.М. Лычковским (1968) [5], при нарушении венозного оттока — С.В. Чемезовым (1984) [6], при одномоментном нарушении артериального кровоснабжения и венозного оттока — Д.А. Илюхиным (2008) [7].

В качестве основного подопытного животного в экспериментальной офтальмологии из-за высокой репродуктивности и особенностей регенераторных процессов используется кролик, кроме того, морфометрические параметры его глаза близки и сопоставимы с параметрами глаза человека.

Ресничное тело глаза кролика — это плоское образование, в котором длина значительно превышает толщину, т.к. не содержит столь выраженной ресничной мышцы, что отличает его от ресничного тела глаза человека, обеспечивающего процесс аккомодации. Кроме того, у кролика большой артериальный круг располагается в радужке, тогда как у человека он находится в ресничном теле и является главным распределительным сосудом переднего отдела глазного яблока [8].

Перспективным направлением современной хирургии является аллотрансплантация, источником для которой являются кадаверные ткани. Преимущество их заключается в отсутствии выраженной иммунной реакции, замещении трансплантата вновь образованной тканью, а также возможностью консервации и создания тканевого банка.

Широкое распространение в России получил материал «Аллоплант», представляющий собой консервированные трупные ткани, при обработке которых достигается их низкая иммуногенность [9]. Экспериментальные исследования и клиническое применение выпускаемых биоматериалов «Аллоплант» является неоспоримым подтверждением их избирательного регенеративного воздействия на ткани. Это направление биомедицины дает широкие возможности в лечении сосудистых заболеваний глаза, в том числе и субатрофии.

Цель исследования — изучить анатомо-морфологические изменения глазного яблока кролика при экспериментальной субатрофии и после применении биологического материала «Аллоплант» для реваскуляризации ресничного тела.

Задачи

1. Изучить анатомические изменения ресничного тела кролика в условиях созданной экспериментальной субатрофии глазного яблока.
2. Выявить анатомические изменения микроциркуляции ресничного тела кролика после реваскуляризации биоматериалом «Аллоплант».

Материал и методы

Экспериментальные исследования проведены на 15 кроликах (30 глаз) породы шиншилла весом 2,0-2,5 кг. Всем животным сформирована модель субатрофии глазного яблока путем коагуляции задних длинных ресничных артерий с одномоментной перевязкой общей сонной артерии.

Операции проводились под действием препарата «Ромитар», вводимым внутриплеврально в расчете 1,5 мл/кг. Местная анестезия глазного яблока осуществлялась путем введения 1,5 мл 2%-ного лидокаина ретробульбарно, накладывался блефаростат. Конъюнктива разрезалась параллельно лимбу длиной 5-7 мм. Для обнажения медиальной задней длинной ресничной артерии глазное яблоко фиксировалось путем наложения лигатуры на нижнюю и внутреннюю прямые мышцы и отводилось кнаружи. Аналогично процедура повторялась с латеральной стороны, глазное яблоко отводилось в противоположную сторону. Сосуды коагулировались в месте прободения склеры аппликацией наконечника коагулятора, с экспозицией 2-3 секунды. На конъюнктиву накладывались 1-2 узловатых шва.

Для обнажения общей сонной артерии проводился срединный линейный разрез справа кожи шеи подопытного животного, раздвигая глубьлежащие ткани, выделялась общая сонная артерия и перевязывалась до ее бифуркации. На кожу накладывались узловые швы.

На 14-й день эксперимента отмечалось изменение средней величины внутриглазного давления — 5,0±2,0 мм рт.ст. Нарушение питания роговицы отмечалось с первого дня в виде отечности, а в дальнейшем развивалось стойкое помутнение на 3–7-е сутки, начало васкуляризации роговицы зафиксировано на 14–18-й день эксперимента, что являлось признаками субатрофии глазного яблока.

На втором этапе после получения модели субатрофии проводилась операция циркулярной реваскуляризации ресничного тела с использованием биоматериала «Аллоплант», изготовленного по заказу с заданными и математически рассчитанными размерами: 8х20 мм, толщиной не более 1 мм, охватывающего 30% окружности ресничного тела по предложенной технике.

Техника операции. Производился последовательный меридиональный разрез конъюнктивы и склеры до цилиарного тела в 4-6 мм от лимба, затем микрошпателем формировался субсклеральный туннель концентрично лимбу и в него укладывался биоматериал «Аллоплант». Края раны склеры ушивались край в край, накладывались швы на конъюнктиву.

Забор материала после операции и изготовление гистотопограмм проводились в сроки через 2 недели, 1, 3, 6 месяцев. Животные выводились из эксперимента методом 3-кратной передозировки препарата «Ромитар».

Результаты

На контрольных гистотопограммах выявлено, что на 14-е сутки эксперимента после создания модели субатрофии отростки венца ресничного тела из-за нарушенного артериального кровоснабжения подвергаются грубым изменениям вплоть до полного разрушения в виде уменьшения их количества и изменения формы (рис. 1). На гистотопограмме контрольного глаза изменений отростков не наблюдалось (рис. 2). В 2-недельном сроке экспериментальной субатрофии наблюдается сокращение ресничного тела, уменьшение количества и размеров отростков венечной части (рис. 3) в отличие от нормы (рис. 4).

Рисунок 1.

Отростки ресничного тела субатрофированного глаза кролика. Срок 2 недели. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 8, Об. 2

Рисунок 2.

Отростки ресничного тела кролика в норме. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 8, Об. 2

Рисунок 3.

Ресничное тело субатрофированного глаза кролика. Срок опыта 2 недели. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 8, Об. 2

Рисунок 4.

Ресничное тело глаза кролика в норме. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 8, Об. 2

Воспалительная реакция у всех животных купировалась на фоне инстилляций антибиотиков и кортикостероидов на 3–5-й день.

Биоматериал «Аллоплант», помещенный между соединительной и сосудистой оболочками глаза в первые две недели вызывает первичную реакцию в виде асептического воспаления. В трансплантате при этом определяются зоны инфильтрации и пролиферации. Граница между оболочками глаза и трансплантатом не определяется из-за слипчивого процесса (рис. 5). В составе инфильтрата преобладают макрофаги и фибробласты, из собственных оболочек глаза наблюдается начальная постепенная миграция пигментных клеток из собственных оболочек глаза в Аллоплант от периферии к центру (рис. 6).

Рисунок 5.

Аллоплант в структурах глаза кролика. Срок 1 месяц. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 5. Об. 3,7

Рисунок 6.

Аллоплант в структурах глаза кролика. Срок 2 месяца. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 5. Об. 3,7

Трансплантат, состоящий из рыхло расположенных коллагеновых волокон и пучков, свободно инфильтрируется клеточными элементами, васкуляризуется и замещается тканями реципиента, формируя новообразованную рыхлую волокнистую соединительную ткань, что соответствует репаративной регенерации заместительного типа. Замещение соединительнотканного аллотрансплантата является упорядоченным процессом в пространстве и времени. Во все сроки эксперимента наблюдается постепенное уменьшение трансплантата в размерах, границы между ним и оболочками глаза стираются (рис. 7).

Рисунок 7.

Аллоплант в структурах глаза кролика. Срок 6 месяцев. Окраска по Ван Гизону. Тангенциальный срез. Микрофотография. Ок. 8, Об. 2

Заключение

1. На экспериментальной модели субатрофии глазного яблока выявлены анатомические изменения ресничного тела кролика после циркулярной раваскуляризации биоматериалом «Аллоплант».
2. Полученные результаты свидетельствуют о позитивном влиянии биологического материала «Алоплант» в большинстве случаев в виде стабилизации размеров глазного яблока и внутриглазного давления.
3. Обоснована эффективность применения биоматериала «Аллоплант» при данной патологии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Крылова Т.Г. Источники кровоснабжения зрительного анализатора и пути венозного оттока от него у человека и некоторых лабораторных животных: автореф. дис. … канд. мед. наук. Челябинск, 1968. — 20 с.
2. Веселовская З.Ф. К вопросу о топографии нервно-сосудистого пучка системы длинной задней цилиарной артерии // Вопросы сосудистой патологии органа зрения: сборник научных трудов кафедры глазных болезней. — Харьков, 1972. — С. 156-165.
3. Волошинов Д.Б. Особенности строения сосудистой оболочки глаза кролика и возможность создания в ней коллатерального кровообращения // Вопросы сосудистой патологии органа зрения: Сборник научных трудов кафедры глазных болезней. — Харьков, 1972. — С. 182-184.
4. Morrison J.C., De Frank М.P., Van Buskirk E.M. Regional microvascular anatomy of the rabbit ciliary body // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. — 1987. — Vol. 28, №8. — P. 1314-1324.
5. Лычковский Л.М. Ранние сроки развития коллатерального кровообращения в глазном яблоке // Архив АГЭ. — 1968. — Т. LIV, №4. — С. 36-42.
6. Чемезов C.B. Морфофункциональные данные о состоянии сосудистого русла глаза при нарушениях венозной гемодинамики в эксперименте // Физиол и патол. механизмов адаптации органа зрения. — Владивосток, 1983. — Т. 2. — С. 175-177.
7. Илюхин Д.А. с соавт. Различия макромикроскопического строения и микротопографии источников кровоснабжения и кровеносного русла переднего отдела глаза кролика в норме и при нарушении кровоснабжения // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. — 2008. — №4 (20). — С. 154-156.
8. Пряхин A.B. Различия в анатомическом строении и микротопографии кровеносного русла ресничного тела глаза и его изменения при местном нарушении кровоснабжения: автореф. дис. … канд. мед. наук. — Оренбург, 2006. — 26 с.
9. Мулдашев Э.Р. Теоретические и прикладные аспекты создания аллотрансплантатов серии «Аллоплант» для пластической хирургии лица: автореф. дис. …д-ра мед. наук. — Санкт-Петербург, 1994. — 50 с.

REFERENCES

1. Krylova T.G. Istochniki krovosnabzheniya zritel’nogo analizatora i puti venoznogo ottoka ot nego u cheloveka i nekotorykh laboratornykh zhivotnykh: avtoref. dis. … kand. med. nauk [Sources of blood supply to the visual analyzer and the way of venous outflow from it in humans and some laboratory animals. Synopsis of dis. PhD med. sci]. Chelyabinsk, 1968. 20 p.
2. Veselovskaya Z.F. K voprosu o topografii nervno-sosudistogo puchka sistemy dlinnoy zadney tsiliarnoy arterii [To the question of topography of the neurovascular bundle of the system of the long posterior ciliary artery]. Voprosy sosudistoy patologii organa zreniya: sbornik nauchnykh trudov kafedry glaznykh bolezney. Kharkov, 1972. Pp. 156-165.
3. Voloshinov D.B. Osobennosti stroeniya sosudistoy obolochki glaza krolika i vozmozhnost’ sozdaniya v ney kollateral’nogo krovoobrashcheniya [Features of the structure of the choroid of the rabbit eye and the possibility of creating a collateral circulation in it]. Voprosy sosudistoy patologii organa zreniya: Sbornik nauchnykh trudov kafedry glaznykh bolezney. Kharkov, 1972. Pp. 182-184.
4. Morrison J.C., De Frank M.P., Van Buskirk E.M. Regional microvascular anatomy of the rabbit ciliary body. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci, 1987, vol. 28, no. 8, pp. 1314-1324.
5. Lychkovskiy L.M. Early terms of development of collateral circulation in the eyeball. Arkhiv AGE, 1968, vol. LIV, no. 4, pp. 36-42 (in Russ.).
6. Chemezov C.B. Morfofunktsional’nye dannye o sostoyanii sosudistogo rusla glaza pri narusheniyakh venoznoy gemodinamiki v eksperimente [Morfofunktionalnye data on the state of the vascular bed of the eye for violations of venous hemodynamics in the experiment]. Fiziol i patol. mekhanizmov adaptatsii organa zreniya. Vladivostok, 1983. Vol. 2. Pp. 175-177.
7. Ilyukhin D.A. et al. Differences in macromicroscopic structure and microtopography of sources of blood supply and blood flow in the anterior part of the rabbit’s eye in norm and in violation of blood supply. Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta, 2008, no. 4 (20), pp. 154-156 (in Russ.).
8. Pryakhin A.B. Razlichiya v anatomicheskom stroenii i mikrotopografii krovenosnogo rusla resnichnogo tela glaza i ego izmeneniya pri mestnom narushenii krovosnabzheniya: avtoref. dis. … kand. med. nauk [Differences in the anatomical structure and microtopography of the ciliated channel of the ciliary body of the eye and its changes with local disturbance of the blood supply. Synopsis of dis. PhD med. sci]. Orenburg, 2006. 26 p.
9. Muldashev E.R. Teoreticheskie i prikladnye aspekty sozdaniya allotransplantatov serii «Alloplant» dlya plasticheskoy khirurgii litsa: avtoref. dis. …d-ra med. nauk [Theoretical and applied aspects of creating allografts of the alloplant series for plastic facial surgery. Synopsis of dis. PhD med. sci]. Saint Petersburg, 1994. 50 p.