УДК:613.99:611.013:504.75:665.6

Ф.К. ТЕТЕЛЮТИНА¹, М.К. ИВАНОВА¹, А.Н. БАКШАЕВА^1, 2, Е.П. КУЗНЕЦОВА^1, 2, Е.В. МИХАЙЛОВА²

 ¹Ижевская государственная медицинская академия МЗ РФ, г. Ижевск

²Первая республиканская клиническая больница МЗ УР, г. Ижевск

Контактная информация:

Бакшаева Анна Николаевна — ассистент кафедры гигиены, врач акушер-гинеколог

Адрес: 426034, г. Ижевск, ул. Коммунаров, 281, тел.: +7-912-450-13-83, e—mail: bakshaevaanna@mail.ru

В Российской Федерации, несмотря на предпринимаемые усилия, на протяжении последних десятилетий остается высоким уровень женского бесплодия, что ухудшает ситуацию снижения рождаемости. Среди множества причин бесплодия остается недостаточно изученным экологический фактор, в частности влияние факторов добычи нефти на ранний эмбриогенез у женщин, проживающих на территории нефтяного производства.

Цель исследования — оценить особенности развития эмбрионов в течение первых пяти суток у женщин, проживающих на территории добычи нефти.

Материал и методы. Проведен анализ 186 эмбриологических протоколов женщин, получавших лечение бесплодия с применением методов ВРТ в Центре ЭКО и репродукции Первой республиканской клинической больницы МЗ УР в период с 2014 по 2023 г. Основную группу (n = 129) составили женщины, проживающие на территории добычи нефти, группу сравнения (n = 57) — женщины, проживающие на территории отсутствия добычи нефти. Группы были сопоставимы по доле полученных зрелых ооцитов, оплодотворения, дробления, компактизации, бластуляции.

Результаты. Среди видов бесплодия в обеих группах преобладало женское бесплодие трубного происхождения. У бесплодных женщин, проживающих на территории добычи нефти, чаще отсутствовали ооциты. При оценке качества эмбрионов на пятые сутки развития выявлено, что доля эмбрионов низкого качества у женщин в основной группе в 1,8 раза выше, чем у женщин группы сравнения. Частота наступления беременности и родов в обеих группах не имела статистически значимой разницы.

Выводы. В результате проведенного анализа показано негативное влияние факторов процесса нефтедобычи на ранние этапы эмбриогенеза.

Ключевые слова: женское бесплодие, добыча нефти, эмбрион.

 

F.K. TETELYUTINA¹, M.K. IVANOVA¹, A.N. BAKSHAEVA^1, 2, E.P. KUZNETSOVA^1, 2, E.V. MIKHAILOVA²

 ¹Izhevsk State Medical Academy, Izhevsk

²First Republican Clinical Hospital, Izhevsk

Embryogenesis defects in women living in oil production areas

 Contact details:

Bakshaeva A.N. — Assistant Lecturer of the Department of Hygiene, obstetrician-gynecologist

Address: 281 Kommunarov St., Izhevsk, Russian Federation, 426056, tel.: +7-912-450-13-83, e-mail: bakshaevaanna@mail.ru

In the Russian Federation, despite the efforts made, the level of female infertility has remained high over the past decades, aggravating a decrease in the birth rate. Among the many causes of infertility, the environmental factor remains insufficiently studied, in particular, the influence of oil production factors on early embryogenesis in women living in oil production areas.

The purpose — to assess the features of embryo development during the first five days in women living in an oil production area.

Material and methods. We analyzed 186 embryological protocols of women who received infertility treatment using ART methods at the IVF and Reproduction Center of the First Republican Clinical Hospital of Udmurt Republic from 2014 to 2023. The main group (n = 129) consisted of women living in the oil production area, the comparison group (n = 57) consisted of women living in the area without oil production. The groups were comparable in the proportion of mature oocytes, fertilization, cleavage, compaction, and blastulation.

Results. Female infertility of tubal origin dominated in both groups. Infertile women living in the oil production area more often had no oocytes. When assessing the quality of embryos on the fifth day of development, it was found that the proportion of low-quality embryos women in the main group was 1.8 times higher than in the comparison group. The frequency of pregnancy and childbirth in both groups did not have a statistically significant difference.

Conclusions. The analysis proved the negative impact of oil production processes on the early stages of embryogenesis.

Key words: female infertility, oil production, embryo.

 

Научным сообществом в мире и Российской Федерации проблема бесплодия признана исключительно важной. В связи с этим в России принимаются меры на федеральном и региональном уровнях по улучшению ситуации. На протяжении последних десятилетий в стране фиксируется стабильно высокий уровень числа бесплодных пар, который в разных регионах составляет от 10 до 20% и более [1]. По данным формы № 12 Росстата, в 2023 г. в РФ число бесплодных женщин составило 254,8 тыс. [2]. С каждым годом увеличивается число циклов вспомогательных репродуктивных технологий (далее — ВРТ). По данным регистра ВРТ «Российской ассоциации репродукции человека» за 2021 г., число циклов ВРТ составило 161 705, произошло 1236,5 тыс. родов, доля родов после ВРТ составила 2,7% от общего числа. С 2024 г. в диспансеризацию взрослого населения включен скрининг оценки репродуктивного здоровья мужчин и женщин. Несмотря на все прилагаемые усилия, частоту бесплодия не удается снизить.

Рутинные методы обследования бесплодной пары не позволяют в полной мере установить причину бесплодия. Широкий спектр причин бесплодия включает и экологический фактор, влияние которого реализуется на всех уровнях репродуктивного процесса: от гормональных нарушений у женщин до дефектов эмбриогенеза и нарушений имплантации. В клинической практике в большинстве случаев первая программа ЭКО становится «диагностической», позволяющей выявить причины бесплодия на уровне гаметогенеза или эмбриогенеза. Одной из причин инфертильности является токсическое влияние репротоксикантов окружающей среды. По результатам анализа В.Б. Алексеева [3], установлены химические вещества, обладающие репротоксическим (хром, свинец, фенол), гонадотоксическим (бензол, марганец, никель), эмбриотоксическим (толуол, бенз(а)пирен, этилбензол) и фетотоксическим (ксилол, тетрахлорэтилен, трихлорэтилен) действием. Влияние химических веществ и проживание в неблагополучных санитарно-гигиенических условиях внешней среды отнесены к приоритетным факторам риска для формирования патологии женской репродуктивной системы.

Репродуктивная эффективность человека невысока и характеризуется высоким уровнем эмбриональных потерь. Вероятность наступления беременности в одном менструальном цикле 20–30%, в программах ЭКО половина эмбрионов имплантируется, и только четверть развивается в полости матки [4]. Ооцитарный мейоз по своей природе крайне уязвимый процесс для возникновения хромосомных дефектов [5]. Установлено, что сперматозоиды вносят незначительный вклад в формирование эмбриональных анэуплоидий [6, 7]. Иммунная система матери блокирует развитие беременности в случае аномалий развития или хромосомных нарушений эмбриона путем их распознавания децидуализированным эндометрием и элиминацией из полости матки [8]. Такой же механизм реализуется при неблагоприятных внешних условиях [4]. Анеуплоидия приводит к дефектам имплантации и развития эмбриона, что проявляется самопроизвольными абортами или постнатальными аномалиями [9, 10]. Нарушения в сложнейших иммунных механизмах имплантации как со стороны эмбриона, так и со стороны матери приводят к поздней имплантации и, как следствие, к доклинической потери беременности [11]. Клинически все выше описанные механизмы проявляются нарушением менструальной функции, бесплодием и другими гинекологическими заболеваниями, распространенность которых статистически значимо выше на территории экологического неблагополучия на примере регионов с активной добычей нефти, к которым относится Удмуртская Республика [12, 13]. На современном этапе дефекты эмбриогенеза можно оценить в процессе программы экстракорпорального оплодотворения (далее — ЭКО).

Цель исследования — оценить особенности развития эмбрионов в течение первых пяти суток у женщин, проживающих на территории добычи нефти.

Материал и методы

Проведен анализ 186 эмбриологических протоколов женщин, получавших лечение бесплодия с применением методов ВРТ (программа ЭКО) в Центре экстракорпорального оплодотворения и репродукции (Первая республиканская клиническая больница МЗ УР с 2014 по 2023 г.). Сформированы 2 группы: основная группа (n = 129) — женщины c бесплодием, проживающие на территории добычи нефти, группа сравнения (n = 57) — женщины, проживающие на территории отсутствия добычи нефти. Критерии исключения: женщины с подтвержденной хромосомной патологией. Кроме того, результаты обследования женщин анализировались в зависимости от возраста: группа А — критерием для включения в которую явился возраст от 18 до 35 лет включительно, группа В — возраст 36 лет и старше. Полученные данные обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики. Определяли среднюю статистическую величину (М), среднеквадратическое отклонение, ошибку средней (m). Значимость различий оценивали с помощью параметрических методов статистики (критерий Стьюдента), разница средних величин считалась достоверной при p ˂ 0,05. Значимость различий в развитии эмбрионов определялась с применением критерия χ² согласия Пирсона. Использовалось программное обеспечение Microsoft Excel XP, Statistica 9.0.

Результаты

Группы пациенток были сопоставимы по возрасту. Средний возраст женщин основной группы составил 31,8 (5,2) лет, в группе сравнения –— 32,8 (4,7). Среди видов бесплодия, независимо от групп, преобладало бесплодие трубного происхождения (табл. 1).

Таблица 1. Структура бесплодия у обследуемых женщин

Table 1. Structure of infertility in the examined women

Вид бесплодия	Группы				р
	Основная (n = 129)		Сравнения (n = 57)
	Абс.	%	Абс.	%
Бесплодие, связанное с отсутствием овуляции	15	11,6	4	7,0	0,49
Бесплодие трубного происхождения	81	62,8	37	64,9	0,66
Бесплодие маточного происхождения	2	1,6	3	5,3	0,05
Бесплодие, связанное с мужским фактором	15	11,6	7	12,3	0,71
Другие формы женского бесплодия	15	11,6	6	10,5	0,97
Женское бесплодие неуточненное	1	0,8	0	0	0,67

В обеих группах среди методов оплодотворения преобладал метод инсеминации сперматозоидами ооцитов: 68,5 и 67,9% (р = 0,94) соответственно. Следует указать, что методика ИКСИ (от англ. ICSI — интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида в цитоплазму, применяется при неспособности сперматозоидов самостоятельно оплодотворить ооцит) применена у каждой третьей пациентки (в основной группе — в 27,4% программ, в группе сравнения — в 30,4%, р = 0,56). Обращает внимание, что частота применения ИКСИ в 2,4 и 2,5 раза соответственно чаще по отношению к бесплодию, связанному с мужским фактором. Возможно, это обусловлено недооценкой вклада патологии сперматогенеза в инфертильность пары.

Доля эмбрионов на каждой стадии развития исчислялась от общего числа эмбрионов в предыдущую стадию (табл. 2).

Таблица 2. Оценка развития эмбрионов

Table 2. Assessment of embryo development

Стадия развития эмбриона	Эмбрионы				χ²	р
	основная группы (n = 707)		группа сравнения (n = 353)
	Абс.	%	Абс.	%
Получено зрелых ооцитов (0 день)	783		388
Оплодотворение (1 день)	707	90,3	353	91,0	0,142	0,71
Дробление (2 и 3 дни)	685	96,9	342	96,9	0	1,00
Компактизация (4 день)	466	68,0	237	69,3	0,17	0,68
Бластуляция (5–6 дни)	337	72,3	167	70,5	0,27	0,61

Получено 783 зрелых ооцита у 124 женщин основной группы, так как у 5 женщин (3,8%) ооциты в программе ЭКО отсутствовали. В группе сравнения получено 388 зрелых ооцитов у 56 женщин, отсутствовали ооциты у 1 женщины (1,8%), что в 2,2 раза реже по отношению к женщинам, проживающим в экологически неблагополучной территории. В программе ЭКО на одну женщину соответственно получено 6,3 и 7,0 ооцитов. Доля зрелых ооцитов от общего их числа не зависела от экологической ситуации (78,7 и 80,7%). Количество оплодотворенных ооцитов и эмбрионов на стадиях дробления, компактизации и бластуляции в исследуемых группах не имело статистически значимой разницы, р ˃ 0,05.

Оценка качества эмбрионов на пятые-шестые сутки развития проведена в соответствии с методическими рекомендациями «Оценка ооцитов и эмбрионов в лаборатории ВРТ» 2021 г. и классификацией Гарднера Д. с соавт. (1999) [14] (без применения преимплатационной генетической диагностики). Критериями для оценки качества эмбрионов являлись состояние клеток трофэктодермы, внутренней клеточной массы и размер полости (табл. 3).

Таблица 3. Оценка качества эмбрионов на пятые сутки развития

Table 3. Evaluation of embryo quality on the fifth day of development

Категория эмбриона	Эмбрионы				χ²	р
	основная группа n = 337		группа сравнения n = 137
	Абс.	%	Абс.	%
Ранние (оценка качества невозможна)	121	35,9	75	44,9	3,8	0,051
Категория А + В	134	39,8	70	41,9	0,2	0,600
Категория С	82	24,3	22	13,2	8,5	р = 0,004

Доля ранних эмбрионов, качество которых невозможно было оценить, в основной группе составляла 35,9%, в группе сравнения — 44,9% (р = 0,16). В обеих группах без статистически значимой разницы (р = 0,58) преобладали эмбрионы отличного и хорошего качества (категория А, В), перспективные для имплантации. Их доля в основной группе составила 39,8%, в группе сравнения — 41,9%. Необходимо выделить, что доля эмбрионов низкого качества (группа С) в основной группе 24,3%, что статистически значимо выше, чем в группе сравнения — 13,2% (χ² = 8,5, р = 0,004) в 1,8 раза.

Доля эмбрионов, развитие которых не соответствовало временным нормативам (отставание в дроблении), в основной группе составила 14,0%, в группе сравнения — 15,0% (р = 0,52). В основной группе 25,3% эмбрионов остановились в развитии (погибли), в группе сравнения — 24,1%, (р = 0,71).

Частота наступления беременности в результате программы ЭКО в основной группе составила 41,2%, в группе сравнения — 42,3%, р = 0,76. Анализ развития наступивших беременностей показал, что доли биохимических, неразвивающихся беременностей, родов в исследуемых группах были сопоставимы (табл. 4.).

Таблица 4. Исходы программ ВРТ

Table 4. Outcomes of IVF programs

	Основная группа		Группа сравнения		р
	Абс.	%	Абс.	%
Доля биохимических беременностей	21	44,7	10	45,5	0,75
Доля неразвивающихся беременностей	7	14,9	4	18,2	0,48
Доля родов	19	40,4	8	36,3	0,95

В основной группе из 47 беременностей родами завершились 19 беременностей, из них 1 роды — мертвым плодом в сроке 22 недели беременности. Особого внимания заслуживает высокая частота преждевременных родов — 15,8%. По способу родоразрешения лидируют оперативные роды — 52,9%, через естественные родовые пути родоразрешены 47,1% женщин. Остается высоким процент многоплодных беременностей: из 17 родов было 4 родов двойней (23,6%). Всего родился 21 ребенок, из них мальчиков 42,1%, девочек 57,9%. Оценивая морфо-антропометрические данные, следует сказать, что средний рост новорожденных составил 50,4 (2,8) см. Установлено, что средний вес составил 2943,6 (500,0) г, по весу 4 новорожденных (19,0%) были недоношенными с массой тела менее 2500 г.

В группе сравнения из 22 беременностей родами завершились 8 беременностей, из них 1 роды — мертвым плодом в сроке 24 недели беременности. Доля преждевременных родов составила 37,5%. По способу родоразрешения роды через естественные родовые пути составили 42,9%, путем кесарева сечения — 57,1%. Из 8 родов было 2 родов двойней (25,0%). Всего родилось 9 детей. В два раза чаще рождались мальчики — 66,7%, чем девочки — 33,3%. По росту новорожденные были доношенными, средний рост составил 50,2 (3,7) см, средний вес составил 2857,3 (435,4) г, по весу 2 новорожденных (22,2%) были недоношенными с массой тела менее 2500 г.

Обсуждение

Полученные данные свидетельствуют о дефектах эмбриогенеза у женщин, проживающих на территории нефтяного техногенеза, что по данным статистической отчетности проявляется как нарушение менструальной функции и бесплодие. Под нарушением менструальной функции скрывается прерывание беременности на ранних этапах в случае имплантации дефектного эмбриона (первые недели беременности), причиной бесплодия может быть отсутствие имплантации (доимплантационные потери беременности). В современных реалиях оказания медицинской помощи данный факт можно выявить только в процессе программы ЭКО. Сопоставимая в обеих группах частота наступления беременности обусловлена элиминацией эмбрионов низкого качества. Достижение беременности в рамках программы ЭКО реализуется в результате профессионального отбора эмбриологом эмбрионов отличного и хорошего качества. Выявленные особенности эмбриогенеза на территории экологического неблагополучия содержат в себе резервы преодоления нарушений репродуктивной функции и, как следствие, увеличение рождаемости.

Выводы

1. В процессе программы ЭКО у женщин основной группы чаще отсутствовали ооциты, чем у женщин группы сравнения.
2. Доля эмбрионов низкого качества у женщин, проживающих на территории добычи нефти, статистически значимо (в 1,8 раза) выше, чем у женщин, проживающих на территории с отсутствием добычи нефти.

Литература

1. Вихрев Д.В., Кицул И.С., Шатохин М.Н., Баулина О.А. Пути совершенствования медицинской помощи при мужском бесплодии: социологический аспект // Здоровье и общество. — 2024. — Т. 80, № 1. — С. 5–10. DOI: 10.56685/18120555_2024_80_1_5
2. Клинические рекомендации «Женское бесплодие», ID:641. — М., 2024. — 91 с. — URL: https:// cr.minzdrav.gov.ru/schema/641_2 (дата обращения: 28.08.2024).
3. Алексеев В.Б., Елисеева Т.Н., Падруль М.М., Олина А.А. Гигиенический анализ факторов риска репродуктивных потерь для обоснования межсекторальных гигиенических профилактических мероприятий // Здоровье населения и среда обитания. — 2011. — № 4 (217). — С. 38–41.
4. Богданова И.М., Болтовская М.Н. Естественная селекция эмбрионов человека: иммунные механизмы контроля качества // Иммунология. — 2019. — Т. 40, №1. — С. 67–72. DOI: 10.24411/0206-4952-2019-11008
5. Иванова А.Д., Семенова М.Л. Хромосомные абберации в эмбриональном развитии человека как биологическое явление // ActaNaturae. — 2023. — Т. 15, № 3 (58). — С. 27–36. DOI: 10.32607/actanaturae.25255
6. McCoy R.C., Demko Z.P., Ryan A., Banjevic M., Hill M., Sigurjonsson S. et al. Evidence of selection against complex mitotic-origin aneuploidy during preimplantation development // PLoS Genet. — 2015. — V. 11 (10). — P. 1005601. DOI: 10.1371/journal.pgen.1005601
7. Bell A.D., Mello C.J., Nemesh J., Brumbaugh S.A., Wysoker A., McCarroll S.A. Insights into variation in meiosis from 31,228 human sperm genomes // Nature. — 2020. — V. 583 (7815). — P. 259–264. DOI: 10.1038/s41586-020-2347-0
8. Teklenburg G., Salker M., Molokhia M., Lavery S. et al. Natural selection of human embryos: decidualizing endometrial stromal cells serve sensors of embryo quality upon implantation // PloS One. — 2010. — V. 5 (4). — P. 10258. DOI: 10.1371/journal.pone.0010258.
9. Munné S., Spinella F., Grifo J., Zhang J., Beltran M.P., Fragouli E., Fiorentino F. Clinical outcomes after the transfer of blastocysts characterized as mosaic by high resolution Next Generation Sequencing- further insights // Eur. J. Med. Genet. — 2020. — V. 63 (2). — P. 103741. DOI: 10.1016/j.ejmg.2019.10374
10. Tiegs A.W., Tao X., Zhan Y., Whitehead C., Kim J., Hanson B. et al. A multicenter, prospective, blinded, nonselection study evaluating the predictive value of an aneuploid diagnosis using a targeted next-generation sequencing-based preimplantation genetic testing for aneuploidy assay and impact of biopsy // Fertility, Sterility. — 2021. — V. 115 (3). — P. 627–637. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2020.07.052
11. Wilcox A.J., Baird D.D., Weinberg C.R. Time implantationof the conceptus and loss of pregnancy // N. Engl. J. Med. — 1999. — Vol. 340 (23). — P. 1796–1799. DOI:10.1056/NEJM199906103402304.
12. Тусупкалиев А.Б., Сарсембаева Л.К., Абдрахманова А.А. Состояние здоровья женщин в нефтегазоносных районах актюбинской области // Медицинский журнал Западного Казахстана. — 2018. — № 57 (1). — C. 10–14.
13. Иванова М.К., Бакшаева А.Н., Кузнецова Е.П., Сабитов М.Р., Лисицына Н.Г. Особенности репродуктивного здоровья женщин и детей, проживающих в районах нефтедобычи // Здоровье, демография, экология финно-угорских народов. — 2018. — № 3. — С. 30–35.
14. Методические рекомендации «Оценка ооцитов и эмбрионов в лаборатории ВРТ». — М. 2021. — 17с. — URL: https://www.rahr.ru/d_pech_mat_metod/MR_evaluation_of_embryos.pdf (дата обращения: 05.09.2024).

REFERENCES

1. Vikhrev D.V., Kitsul I.S., Shatokhin M.N., Baulina O.A. Ways to improve medical care for male infertility: sociological aspect. Zdorov’e i obshchestvo, 2024, vol. 80, no. 1, pp. 5–10 (in Russ.). DOI: 10.56685/18120555_2024_80_1_5
2. Klinicheskie rekomendatsii “Zhenskoe besplodie” [Clinical guidelines «Female infertility»], ID:641. Moscow, 2024. 91 p., available at: https:// cr.minzdrav.gov.ru/schema/641_2 (accessed on: 28.08.2024).
3. Alekseev V.B., Eliseeva T.N., Padrul’ M.M., Olina A.A. Hygienic analysis of risk factors for reproductive losses to justify intersectoral hygienic preventive measures. Zdorov’e naseleniya i sreda obitaniya, 2011, no. 4 (217), pp. 38–41 (in Russ.).
4. Bogdanova I.M., Boltovskaya M.N. Natural selection of human embryos: immune mechanisms of quality control. Immunologiya, 2019, vol. 40, no. 1, pp. 67–72 (in Russ.). DOI: 10.24411/0206-4952-2019-11008
5. Ivanova A.D., Semenova M.L. Chromosomal aberrations in human embryonic development as a biological phenomenon. ActaNaturae, 2023, vol. 15, no. 3 (58), pp. 27–36 (in Russ.). DOI: 10.32607/actanaturae.25255
6. McCoy R.C., Demko Z.P., Ryan A., Banjevic M., Hill M., Sigurjonsson S. et al. Evidence of selection against complex mitotic-origin aneuploidy during preimplantation development. PLoS Genet, 2015, vol. 11 (10), p. 1005601. DOI: 10.1371/journal.pgen.1005601
7. Bell A.D., Mello C.J., Nemesh J., Brumbaugh S.A., Wysoker A., McCarroll S.A. Insights into variation in meiosis from 31,228 human sperm genomes. Nature, 2020, vol. 583 (7815), pp. 259–264. DOI: 10.1038/s41586-020-2347-0
8. Teklenburg G., Salker M., Molokhia M., Lavery S. et al. Natural selection of human embryos: decidualizing endometrial stromal cells serve sensors of embryo quality upon implantation. PloS One, 2010, vol. 5 (4), p. 10258. DOI: 10.1371/journal.pone.0010258.
9. Munné S., Spinella F., Grifo J., Zhang J., Beltran M.P., Fragouli E., Fiorentino F. Clinical outcomes after the transfer of blastocysts characterized as mosaic by high resolution Next Generation Sequencing- further insights. Eur. J. Med. Genet, 2020, vol. 63 (2), pp. 103741. DOI: 10.1016/j.ejmg.2019.10374
10. Tiegs A.W., Tao X., Zhan Y., Whitehead C., Kim J., Hanson B. et al. A multicenter, prospective, blinded, nonselection study evaluating the predictive value of an aneuploid diagnosis using a targeted next-generation sequencing-based preimplantation genetic testing for aneuploidy assay and impact of biopsy. Fertility, Sterility, 2021, vol. 115 (3), pp. 627–637. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2020.07.052
11. Wilcox A.J., Baird D.D., Weinberg C.R. Time implantationof the conceptus and loss of pregnancy. N. Engl. J. Med, 1999, vol. 340 (23), pp. 1796–1799. DOI: 10.1056/NEJM199906103402304.
12. Tusupkaliev A.B., Sarsembaeva L.K., Abdrakhmanova A.A. Health status of women in oil and gas regions of Aktobe region. Meditsinskiy zhurnal Zapadnogo Kazakhstana, 2018, no. 57 (1), pp. 10–14 (in Russ.).
13. Ivanova M.K., Bakshaeva A.N., Kuznetsova E.P., Sabitov M.R., Lisitsyna N.G. Features of reproductive health of women and children living in oil producing areas. Zdorov’e, demografiya, ekologiya finno-ugorskikh narodov, 2018, no. 3, pp. 30–35 (in Russ.).
14. Metodicheskie rekomendatsii “Otsenka ootsitov i embrionov v laboratorii VRT” [Methodical recommendations «Evaluation of oocytes and embryos in the ART laboratory»]. Moscow, 2021. 17 p., available at: https://www.rahr.ru/d_pech_mat_metod/MR_evaluation_of_embryos.pdf (accessed on: 05.09.2024).