УДК 578.834.1

Х.С. ХАЕРТЫНОВ¹, В.А. АНОХИН¹, О.В. ЖЕМКОВА², Л.Х. ВАЛИАХМЕТОВА², Н.А. ШАЙХУТДИНОВА², Л.Ю. МАЛЫХИНА², Т.С. УТЮШЕВА², А.Э. ЕВДОКИМОВА¹, Э.И. НАСЫРОВА¹

 ¹Казанский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Казань

²Республиканская клиническая инфекционная больница им. проф. А.Ф. Агафонова МЗ РТ, г. Казань

Контактная информация:

Хаертынов Халит Саубанович — д.м.н., доцент кафедры детских инфекций

Адрес: 420012, г. Казань, ул. Бутлерова, 49, тел.: +7-903-342-96-27, e—mail: khalit65@yandex.ru

 Эндотелиальная дисфункция — основная причина тромботических осложнений и неблагоприятного исхода заболевания при коронавирусной инфекции COVID-19. Изучение маркеров дисфункции эндотелия у пациентов с COVID-19 позволит определить дополнительные направления терапии нарушений системы гемостаза.

Цель исследования — оценить диагностическую значимость маркеров эндотелиальной дисфункции при среднетяжелых и тяжелых формах COVID-19.

Материал и методы. Проведена оценка маркеров эндотелиальной дисфункции (П-селектина, фактора фон Виллебранда (ФФВ), D-димера и тромбомодулина) у 28 пациентов с коронавирусной инфекцией COVID-19, госпитализированных в ГАУЗ «Республиканская клиническая инфекционная больница им. проф. А.Ф. Агафонова» в период с 16.02.2023 по 07.03.2023. Медиана возраста пациентов на момент обследования составила 66,5 лет. Контрольную группу составили 20 условно здоровых людей аналогичного возраста.

Результаты. Установлено, что среднетяжелые и тяжелые формы COVID-19 сопровождаются повышением в крови значений D-димера и ФФБ, медиана которых повышала значения контроля в 2,6 и 1,9 раза соответственно. При этом достоверных различий показателей П-селектина и тромбомодулина в сравниваемых группах не выявлено. Была установлена умеренно выраженная корреляционная связь уровня П-селектина с абсолютным количеством нейтрофилов в крови. Значения D-димера и тромбомодулина были достоверно выше у пациентов с COVID-19, имевших 2 и более коморбидных заболевания. Высокие значения отношения правдоподобия положительного результата ФФБ и D-димера (LR+ = 8,4) позволяют рассматривать их в качестве надежных параметров для оценки эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19.

Выводы. Эндотелиальная дисфункция при коронавирусной инфекции COVID-19 проявляется повышением в крови значений D-димера и ФФБ. Выявленные изменения указывают на возможность использования в лечении пациентов со среднетяжелым и тяжелым течением COVID-19 кроме антикоагулянтой терапии препаратов, нейтрализующих прокоагулянтные свойства ФФБ.

Ключевые слова: коронавирусная инфекция COVID-19, эндотелиальная дисфункция.

 KH.S. KHAERTYNOV¹, V.A. ANOKHIN¹, O.V. ZHEMKOVA², L.KH. VALIAKHMETOVA², N.A. SHAYKHUTDINOVA², L.YU. MALYKHINA², T.S. UTYUSHEVA², A.E. EVDOKIMOVA¹, E.I. NASYROVA¹

 ¹Kazan State Medical University, Kazan

²Republic Clinical Infectious Diseases Hospital named after Prof. A.F. Agafonov, Kazan

Endothelial dysfunction in patients with coronavirus infection COVID-19

 Contact details:

Khaertynov Kh.S. — MD, Associate Professor of the Department of Children’s Infections

Address: 49 Butlerov St., Kazan, Russian Federation, 420110, tel.: +7-903-342-96-27, e-mail: khalit65@yandex.ru

Endothelial dysfunction is the main cause of thrombotic complications and unfavorable disease outcome in COVID-19. The study of markers of endothelial dysfunction in patients with COVID-19 will help to determine additional directions for the treatment of hemostatic disorders.

The purpose — to evaluate the diagnostic significance of endothelial dysfunction markers in moderate and severe forms of COVID-19.

Material and methods. The study was carried out in 28 patients with COVID-19 hospitalized at the Republic Clinical Infectious Diseases Hospital (Kazan) from 02.16.2023 to 03.07.2023. The median age of patients was 66.5 years. The control group consisted of 20 healthy people of the same age.

Results. It was found that moderate and severe forms of COVID-19 are accompanied by increased values of D-dimer and VWF in the blood, the medians of which were 2.6 and 1.9 times higher than control values, respectively. No significant differences in the values of P-selectin and thrombomodulin were detected in the compared groups. A moderate correlation was established between the level of P-selectin and the absolute number of neutrophils in the blood. It was found that the values of D-dimer and thrombomodulin were significantly higher in patients with COVID-19 who had two or more comorbid diseases. The high likelihood ratios of FFB and D-dimer positivity (LR+ = 8.4) allow considering them as reliable parameters for assessing endothelial dysfunction in patients with COVID-19.

Conclusion. Endothelial dysfunction in COVID-19 disease is manifested by increased levels of D-dimer and VWF in the blood. The identified changes indicate the possibility of using medications that neutralize VWF in addition to anticoagulant drugs.

Key words: coronavirus infection COVID-19, endothelial dysfunction.

Тромбофилия — одно из наиболее значимых клинико-лабораторных проявлений коронавирусной инфекции COVID-19, определяющих тяжесть заболевания и прогноз [1, 2]. Развивающиеся вследствие COVID-ассоциированной коагулопатии тромбозы являются основной причиной неблагоприятного исхода при COVID-19 [3]. Частота обнаружения микротромбов у умерших пациентов составляет 91,3% [4]. Ключевой механизм развития коагулопатии при COVID-19 — дисфункция эндотелия, возникающая вследствие целого комплекса воздействий на внутреннюю выстилку сосудов, в том числе за счет избыточного синтеза клетками врожденного иммунитета провоспалительных цитокинов (фактора некроза опухоли-альфа, интерлейкинов-1,6 и др.) [5].

Еще в начале пандемии COVID-19 у пациентов с тяжелым течением заболевания было выявлен рост в крови уровня фактора фон Виллебранда (ФФБ), одного из ключевых маркеров эндотелиальной дисфункции [6]. Между тем маркеры повреждения эндотелия различны, одни из них представлены молекулами адгезии (селектины), обеспечивающими взаимодействие с лейкоцитами, другие — прокоагулянтными (ФФБ) и антикоагулянтными факторами (тромбомодулин) [7, 8].

Изучение маркеров дисфункции эндотелия у пациентов с COVID-19, имеющих различное функциональное значение, позволит установить ведущие механизмы повреждения эндотелия и определить дополнительные направления терапии нарушений системы гемостаза.

Цель исследования — оценить диагностическую значимость маркеров эндотелиальной дисфункции при среднетяжелых и тяжелых формах COVID-19.

Материал и методы

Проведено исследование маркеров эндотелиальной дисфункции у 28 пациентов с коронавирусной инфекцией COVID-19, госпитализированных в ГАУЗ «Республиканская клиническая инфекционная больница им. проф. А.Ф. Агафонова» (ГАУЗ «РКИБ») в период с 16.02.2023 по 07.03.2023. Медиана возраста пациентов на момент обследования составила 66,5 лет. Диагноз COVID-19 устанавливался на основании клинико-анамнестических данных, подтверждался детекцией в смывах из носоглотки РНК SARS-CоV2 и обнаружением в легких на компьютерной томографии (КТ) изменений в виде «матового стекла». РНК SARS-CоV2 из носоглотки была выделена у 27 пациентов (96%). Компьютерная томография органов грудной клетки у 17 больных (61%) выявила объем поражения легких, соответствующий КТ-1, у 7 (25%) — КТ-2, у 4 пациентов (14%) — КТ-3. У большинства больных (21 человек) заболевание протекало в среднетяжелой, у 7 пациентов — в тяжелой форме. Все пациенты с COVID-19 получали противовирусную, противовоспалительную и антикоагулянтную терапию. Респираторная поддержка осуществлялась 11 пациентам (39%). Коморбидные состояния регистрировались в 27 (96%) случаях, в контрольной группе — у 16 (80%). Чаще всего регистрировались гипертоническая болезнь и сахарный диабет. Подробная характеристика пациентов представлена в табл. 1. Во всех случаях заболевание завершилось выздоровлением.

Контрольную группу составили 20 условно здоровых людей аналогичного возраста.

Для оценки выраженности эндотелиальной дисфункции проведено определение в венозной крови значений П-селектина, фактора фон Виллебранда (ФФВ), тромбомодулина и D-димера. Определение показателей проводилось методом иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов Ray Boitech Inc., USA (для определения П-селектина), Hycult biotech, USA (для определения тромбомодулина), Technoclone, Austria (для определения ФФБ) и турбодиметрически с использованием реагентов Siemens Healthcare Diagnostics, Germany (для определения D-димера) в соответствии с инструкциями производителя. Исследование маркеров эндотелиальной дисфункции проведено однократно в периоде разгара COVID-19. Исследование было выполнено в ГАУЗ «РКИБ».

Таблица 1. Характеристика пациентов

Table 1. Characteristic of patients

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием статистической программы Statistica for Windows 6,1 (Statsoft, Tulsa, OK, USA). Для определения достоверности различий между сравниваемыми группами использовали критерий Манна — Уитни. Для оценки связи двух признаков (r) использовали непараметрический метод корреляционного анализа Спирмена. Используя таблицы сопряженности, рассчитывали чувствительность (Se); специфичность (Sp); показатели отношения правдоподобия (LR) для положительного и отрицательного результатов; относительный риск.

Данное исследование было одобрено локальным этическим комитетом Казанского ГМУ (протокол № 2 от 14.02. 2023).

Результаты

Установлено, что среднетяжелые и тяжелые формы COVID-19 сопровождаются повышением в крови значений D-димера и ФФБ, медиана которых повышала значения контроля в 2,6 и 1,9 раза соответственно (табл. 2). При этом достоверных различий показателей П-селектина и тромбомодулина в сравниваемых группах не выявлено.

 Таблица 2. Маркеры эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19 (Me, МКР)

Table 2. Markers of endothelial dysfunction in patients with COVID-19 (Me, МКР)

Примечание: * р — уровень статистической значимости.

Note: * p — level of statistical significance.

 Учитывая роль воспалительного процесса в развитии COVID-ассоциированной коагулопатии, проведен корреляционный анализ изучаемых маркеров эндотелиальной дисфункции с показателями воспаления (С-реактивным белком и количеством нейтрофилов в крови). Была установлена умеренно выраженная корреляционная связь уровня П-селектина с абсолютным количеством нейтрофилов крови (табл. 3).

Важную роль в развитии эндотелиальной дисфункции имеют коморбидные состояния — гипертоническая болезнь, сахарный диабет, ожирение. Установлено, что значения тромбомодулина и D-димера были достоверно выше у пациентов с COVID-19, имевших два и более коморбидных заболевания (табл. 4). Ассоциации между значениями П-селектина, ФФБ и поликоморбидным статусом не установлено.

Таблица 3. Результаты корреляционного анализа между маркерами эндотелиальной дисфункции и воспаления

Table 3. Results of correlation analysis between endothelial dysfunction markers and inflammation

 Таблица 4. Маркеры эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19, имеющих коморбидные состояния (Me, МКР)

Table 4. Endothelial dysfunction markers in patients with COVID-19 with comorbid conditions (Me, МКР)

Примечание: * р — уровень статистической значимости.

Note: * p — level of statistical significance.

 Проведена оценка операционных характеристик маркеров эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19. Данные представлены в табл. 5.

 Таблица 5. Оценка диагностической ценности маркеров эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19

Table 5. Estimation of diagnostic value of endothelial dysfunction markers in patients with COVID-19

Примечание: RR — относительный риск, Se — чувствительность теста, Sp — специфичность теста, LR+ — отношение правдоподобия положительного результата теста, LR— — отношение правдоподобия отрицательного результата теста, р — уровень статистической значимости.

Note: RR – relative risk, Se – test sensitivity, Sp – test specificity, LR+ – likelihood ratio of a positive test result, LR- – likelihood ratio of a negative test result, p – level of statistical significance.

Как видно из представленной таблицы, наибольшую диагностическую ценность в определении эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19 представляют ФФБ и Д-димер (р < 0,05). Положительные результаты тестов на ФФБ и D-димер были максимально правдоподобны (LR+ = 8,4), что позволяет рассматривать их как достаточно надежные.

Обсуждение

Дисфункция эндотелия — ключевой фактор, способствующий развитию COVID-ассоциированной коагулопатии. Эндотелиальные клетки играют значимую роль в процессах активации и адгезии лейкоцитов, тромбоцитов, в регуляции проницаемости сосудистой стенки, в поддержании физиологического равновесия между свертывающей и противосвертывающей системами крови [9]. Активация клеток врожденного иммунитета (моноцитов, нейтрофилов) и избыточный синтез провоспалительных цитокинов (фактора некроза опухоли-альфа, интерлейкинов-1, 6, 8 и др.) являются основными причинами повреждения эндотелия у пациентов с COVID-19 [5]. Результатом этого процесса является активная продукция эндотелиоцитами и тромбоцитами факторов, обозначаемых термином «маркеры эндотелиальной дисфункции». Следует отметить, что эти маркеры функционально неоднородны: одни из них (селектины) способствует адгезии активированных лейкоцитов, другие — меняют баланс в системе гемостаза в сторону гиперкоагуляции (D-димер, ФФБ) или гипокоагуляции (тромбомодулин) [7, 8].

Факторы, обеспечивающие взаимодействие активированных эндотелиоцитов с клетками крови — селектины представляют собой трансмембранные гликопротеины, экспрессированные на поверхности мегакариоцитов и эндотелиальных клеток [10]. Повышенный уровень П-селектина в крови у пациентов с тяжёлым течением COVID-19 рассматривается в качестве предиктора тромботических осложнений [11–13]. В нашем исследовании наибольшие значения П-селектина отмечались именно при тяжелых формах COVID-19, однако медиана его достоверно не отличалась от аналогичного показателя группы контроля, что, вероятно, объясняется преобладанием пациентов со среднетяжелым течением заболевания. При этом нами установлена умеренно выраженная корреляционная связь уровня П-селектина с абсолютным количеством нейтрофилов периферической крови. Селектины, как известно, инициируют рекрутирование нейтрофилов в зону воспаления и повреждения тканей [14]. Результатом этого процесса является повышение количества и активности нейтрофилов в крови у пациентов с COVID-19 при отсутствии признаков бактериальной инфекции и активное формирование нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ), одного из значимых механизмов тромбообразования [15].

Для диагностики тромботических осложнений в клинической практике традиционно используется определение в крови уровня D-димера, являющегося продуктом деградации фибрина [16–17]. Если место и роль П-селектина в тромбообразовании ассоциируется с начальным ее этапом — адгезией лейкоцитов к эндотелиальным клеткам и формированием лейкоцитарно-тромбоцитарных комплексов, то высокий уровень D-димера отражает факт уже состоявшегося тромбоза [18]. Еще в начале пандемии у пациентов COVID-19 было выявлено повышение в крови этого маркера [19], высокие значения которого ассоциировались с тяжестью заболевания и плохим прогнозом [20]. В ранее проведенном нами исследовании было установлено, что относительный риск летального исхода у пациентов с COVID-19 при госпитализации был в 3,3 раза выше при уровне D-димера более 1000 нг/мл [21]. В данном исследовании повышение уровня D-димера отмечалось в 23 из 28 случаев (82%), а медиана показателя была в 2,6 выше, чем в группе контроля. При этом значения D-димера выше 1000 нг/мл зарегистрированы только в 6 из 28 случаев (21%), что объясняется преобладанием среднетяжелых форм заболевания.

Биомаркер эндотелиальной дисфункции фактор фон Виллебранда (ФФВ) представляет собой мультимерный белок, способствующий адгезии тромбоцитов на эндотелии поврежденных стенок сосудов [22]. Активность ФФБ регулируется цинкосодержащим ферментом металлопротеазой ADAMTS-13, расщепляющим сверхкрупные мультимеры белка (> 10 000 кДа) до структур размерами менее 10 000 кДа [23, 24]. Известно, что накопление сверхбольших мультимеров способствует тромбообразованию в сосудах жизненно важных органов (головной мозг, сердце и почки), являясь причиной формирования тромботических микроангиопатий (ТМА) [25]. Характерными признаками ТМА являются тромбоцитопения и гемолитическая анемия, что связано с потреблением и разрушением тромбоцитов и эритроцитов в микроциркуляторном русле. При тяжелых формах COVID-19 активность фактора фон Виллебранда может превышать протеолитическую активность ADAMTS-13 и способствовать развитию тромботической тромбоцитопенической пурпуры (ТТП) [26]. Клинические проявления ТТП разнообразны и могут проявляться неврологической симптоматикой от небольших нарушений поведения и затуманенности сознания до выраженных сенсорно-моторных нарушений, болями в животе, панкреатитом, патологией сердечного ритма, нарушением зрения [27]. Еще в начале пандемии было установлено повышение уровня ФФБ у пациентов с тяжелыми формами новой коронавирусной инфекции [6]. В метаанализе, выполненным Wibowo A. и соавт., было показано, что высокий уровень ФФВ в крови ассоциируется с риском летального исхода пациентов с COVID-19 [28]. В нашем исследовании медиана изучаемого показателя была в 1,9 раза выше, по сравнению с показателем группы контроля, что указывает на дисбаланс в оси ФФВ/ADAMTS-13 даже у пациентов со среднетяжелым течением коронавирусной инфекции. При этом следует отметить, что ни у одного из исследованных нами пациентов проявлений ТМА в виде гемолитической анемии и тромбоцитопении менее 100×10⁹/л выявлено не было.

Другой маркер эндотелиальной дисфункции, тромбомодулин, трансмембранный гликопротеин, экспрессирующийся на поверхности эндотелии и клеток крови (лейкоцитах и тромбоцитах) [29]. В отличие от П-селектина, D-димера и ФФБ тромбомодулин обладает антикоагулянтными свойствами [8]. Тяжелые формы COVID-19 характеризуются потерей на поверхности эндотелия молекул с антикоагулянтной активностью, в том числе тромбомодулина и повышением его уровня в крови [30]. Этот факт был подтвержден постмортальными исследованиями, выявившими сниженную экспрессию тромбомодулина в альвеолярных капиллярах у пациентов, умерших от COVID-19 [30]. В нашем исследовании значения тромбомодулина у пациентов с COVID-19 оказались повышенными в 39% случаев, однако медиана показателя достоверно не отличалась от значений контроля.

Значимая роль в повреждении эндотелиального гликокаликса придается заболеваниям сердечно-сосудистой системы — атеросклерозу, артериальной гипертензии, а также сахарному диабету и ожирению [31]. В нашем исследовании 27 из 28 пациентов (96%) с COVID-19 имели коморбидные состояния, среди которых преобладали гипертоническая болезнь и сахарный диабет. Было установлено, что значения тромбомодулина и D-димера были достоверно выше у пациентов, имеющих 2 и более коморбидных заболевания.

Таким образом, проведенное нами исследование показало, что эндотелиальная дисфункция при COVID характеризуется повышением в крови уровня ФФБ и D-димера, тогда как значения П-селектина и тромбомодулина достоверно не отличались от значений контроля. Высокие значения отношения правдоподобия положительного результата (LR+) ФФБ и D-димера позволяют рассматривать их в качестве надежных параметров для оценки эндотелиальной дисфункции у пациентов с COVID-19. И последнее. Лечение COVID-ассоциированной коагулопатии в условиях стационара традиционно проводится препаратами гепарина. Однако у пациентов с тяжелым течением COVID-19 тромбоз может возникнуть даже при использовании терапевтических доз низкомолекулярных гепаринов [32]. В связи с этим перспективным представляется использование препаратов с анти-ФФБ активностью [33].

Выводы

Коронавирусная инфекция COVID-19 сопровождается развитием эндотелиальной дисфункции, проявляющейся повышением в крови значений D-димера и ФФБ. Выявленные изменения указывают на возможность использования в лечении пациентов со среднетяжелым и тяжелым течением COVID-19, кроме антикоагулянтой терапии, также препаратов, нейтрализующих прокоагулянтные свойства ФФБ.

Исследование выполнено при финансовой поддержке ФГБОУ ВО Казанский ГМУ МЗ РФ (Грант № 2/22-1 от 01.08.2022)

Хаертынов Х.С.

https://orcid.org/0000-0002-9013-4402

Анохин В.А.

https://orcid.org/0000-0003-1050-9081

Жемкова О.В.

https://orcid.org/0009-0009-2081-9391

Валиахметова Л.Х.

https://orcid.org/0009-0007-3204-4031

Шайхутдинова Н.А.

https://orcid.org/0009-0004-1612-9009

Малыхина Л.Ю.

https://orcid.org/0009-0009-4084-2249

Утюшева Т.С.

https://orcid.org/0009-0009-3911-9926

Евдокимова А.Э.

https://orcid.org/0000–0001–9851–2386

 Литература

1. Iba T., Warkentin T.E,Thachil J. et al. Proposal of the Definition for COVID-19-Associated Coagulopathy // J. Clin. Med. — 2021. — Vol. 10 (2). — P. 191. DOI: 10.3390/jcm10020191
2. Макацария А.Д., Слуханчук Е.В., Бицадзе В.О. и др. COVID-19, нарушения гемостаза и риск тромботических осложнений // Вестник РАМН. — 2020. — Т. 57, № 4. — С.306–317.
3. Chen W., Pan J.Y. Anatomical and pathological observation and analysis of SARS and COVID-19: microthrombosis is the main cause of death // Biol. Proc. Online. — 2021. — Vol. 23. — P. 1–12. DOI: 10.1186/s12575-021-00142-y
4. Хисматуллин Р.Р., Иваева Р.А., Абдуллаева Ш. и др. Патоморфологические проявления воспалительного микротромбоза при COVID-19 // Казанский медицинский журнал. — 2022. — Т. 103, № 4. — С. 575–587.
5. Fodor A., Tiperciuc B., Login C. et al. Endothelial dysfunction, inflammation, and oxidative stress in COVID-19 — mechanisms and therapeutic targets // OMCL. — 2021. Article ID 8671713.
6. Ladikou E.E., Sivaloganathan H., Milne K.M. et al. Von Willebrand factor (vWF): marker of endothelial damage and thrombotic risk in COVID-19? // Clin. Med. (Lond). — 2020. — Vol. 20 (5). — P. e178–182. DOI: 10.7861/clinmed.2020-0346
7. Andrianto A., Rizkiawan R., Harsoyo P.M. et al. COVID-19 and endothelial dysfunction: biomarkers and potential drug mechanismsct // Indonesian J. Trop. Infect. Dis. — 2021. — Vol. 9 (2). — P. 108–119. DOI: 10.20473/ijtid.v9i2.25489
8. Watanabe-Kusunoki K., Nakazawa D., Ishizu A. et al. Thrombomodulin as a physiological modulator of intravascular injury // Front. Immunol. — 2020. — Vol. 11. — 575890. DOI: 10.3389/fimmu.2020.575890
9. Pons S., Fodil S., Azoulay E. et al. The vascular endothelium: The cornerstone of organ dysfunction in severe SARS-CoV-2 infection // Crit. Care. — 2020. — Vol. 24. — P. 353. DOI: 10.1186/s13054-020-03062-7
10. Tvaroška I., Selvaraj C., Koˇca J. Selectins-the two Dr. Jekyll and Mr. Hyde faces of adhesion molecules — a review // Molecules. — 2020. — Vol. 19. —P. 2835.
11. Watany M.M., Abdou S., Elkolaly R. et al. Evaluation of admission levels of P, E and L selectins as predictors for thrombosis in hospitalized COVID‑19 patients // Clin. Exp. Med. — 2022. — Vol. 22. — P. 567–575. DOI: 10.1007/s10238-021-00787-9
12. Goshua G., Pine A.B., Meizlish M.L. et al. Endotheliopathy in COVID-19-associated coagulopathy: Evidence from a single-centre, cross-sectional study // Lancet Haematol. — 2020. — Vol. 7 (8). — P. 575–582. doi: 10.1016/S2352-3026(20)30216-7.
13. Fenyves B.G., Mehta A., Kays K.R. et al. Plasma P-selectin is an early marker of thromboembolism in COVID-19 // Am. J. Hematol. — 2021. — Vol. 96 (12). — P. E468–471. DOI: 10.1002/ajh.26372
14. Agrati C., Sacchi A., Tartaglia E. et al. The role of P-Selectin in COVID-19 coagulopathy: an updated review // Int. J. Mol. Sci. — 2021. — Vol. 22 (15). — P. 7942. DOI: 10.3390/ijms22157942
15. Middleton E.A., He X.-Y., Denorme F. et al. Neutrophil extracellular traps contribute to immunothrombosis in COVID-19 acute respiratory distress syndrome // Blood. — 2020. — Vol. 136 (10). — P. 1169–1179. DOI: 10.1182/blood.2020007008
16. Wang Z.F., Su F., Lin X.J. et al. Serum D-dimer changes and prognostic implication in 2009 novel influenza A(H1N1) // Thromb. Res. — 2011. — Vol. 127 (3). — P. 198–201. DOI: 10.1016/j.thromres.2010.11.032
17. Klok F.A., Kruip M., van der Meer N.J.M. et al. Incidence of thrombotic complications in critically ill ICU patients with COVID-19 // Thromb. Res. — 2020. — Vol. 191. — P. 145–147. DOI: 10.1016/j.thromres.2020.04.013
18. Li Y., Deng Y., Ye L. et al. Clinical significance of plasma D-dimer in COVID-19 mortality // Front. Med. — 2021. — Vol. 8. — 638097. DOI: 10.3389/fmed.2021.638097
19. Лобастов К.В., Счастливцев И.В., Порембская О.Я. и др. COVID-19-ассоциированная коагулопатия: обзор современных рекомендаций по диагностике, лечению и профилактике // Амбулаторная хирургия. — 2020. — № 3–4. — С. 36–51. DOI: 10.21518/1995-1477-2020-3-4-36-51
20. Tang N., Li D., Wang X. et al. Abnormal coagulation parameters are associated with poor prognosis in patients with novel coronavirus pneumonia // J. Thromb. Haemost. — 2020. — Vol. 18 (4). — P. 844–847. DOI: 10.1111/jth.14768
21. Хаертынов Х.С., Анохин В.А. Халиуллина С.В и др. Воспаление и гемостаз у пациентов с тяжелой формой коронавирусной инфекции COVID-19 // Медицинский вестник Башкортостана. — 2023. — Т. 18, №4. — С. 11–17.
22. Sayyadi M., Hassani S., Shams M. et al. Status of major hemostatic components in the setting of COVID‑19: the effect on endothelium, platelets, coagulation factors, fibrinolytic system, and complement // Ann. Hematol. — 2023. — Vol. 102 (6). — P. 1307–1322. DOI: 10.1007/s00277-023-05234-1
23. Zheng X.L. ADAMTS13 and von Willebrand factor in thrombotic thrombocytopenic purpura // Annu. Rev. Med. — 2015. — Vol. 66. — P. 211–225. DOI: 10.1146/annurev-med-061813-013241
24. Fujikawa K., Suzuki H., McMullen B. et al. Purification of human von Willebrand factor-cleaving protease and its identification as a new member of the metalloproteinase family // Blood. — 2001. — Vol. 98 (6). — P. 1662–1666. DOI: 10.1182/blood.V98.6.1662.
25. Hafez W., Ziade M.A., Arya A. et al. Reduced ADAMTS13 activity in correlation with pathophysiology, severity, and outcome of COVID-19: a retrospective observational study // Int. J. Infect. Dis. — 2022. — Vol. 117. — P. 334–344. DOI: 10.1016/j.ijid.2022.02.019
26. Doevelaar A.A.N., Bachmann M., Hölzer B. et al. Von Willebrand factor multimer formation contributes to immunothrombosis in coronavirus disease 2019 // Crit. Care Med. — 2021. — Vol. 49 (5). — P. E512–520. DOI: 10.1097/CCM.0000000000004918
27. АкиньшинаС.В., БицадзеВ.О., АндрееваМ.Д., МакацарияА.Д. Тромботическая микроангиопатия // Практическая медицина. — 2013. — Т. 76, № 7. — С.7–19.
28. Wibowo A., Pranata R., Lim M.A. et al. Endotheliopathy marked by high von Willebrand factor (vWF) antigen in COVID-19 is associated with poor outcome: a systematic review and meta-analysis // Int. J. Infect. Dis. — 2022. — Vol. 117. — P. 267–273. DOI: 10.1016/j.ijid.2021.06.051
29. Watanabe-Kusunoki K., Nakazawa D., Ishizu A. and Atsumi T. Thrombomodulin as a Physiological Modulator of Intravascular Injury // Front. Immunol. — 2020. — Vol. 11. — 575890. DOI: 10.3389/fimmu.2020.575890
30. Francischettia I.M.B., Toomera K., Zhang Y. et al. Upregulation of pulmonary tissue factor, loss of thrombomodulin and immunothrombosis in SARS-CoV-2 infection // EClinicalMedicine. — 2021. — Vol. 39. — 101069. DOI: 10.1016/j.eclinm.2021.101069.
31. Yamaoka-Tojo M. Vascular endothelial glycocalyx damage in COVID-19 // Int. J. Mol. Sci. — 2020. — Vol. 21 (24). — P. 9712. DOI: 10.3390/ijms21249712
32. Helms J., Tacquard C., Severac F. et al. igh risk of thrombosis in patients with severe SARS-CoV-2 infection: A multicenter prospective cohort study // Int. Care Med. — 2020. — Vol. 46. — P. 1089–1098. DOI: 10.1007/s00134-020-06062-x
33. Gragnano F., Sperlongano S., Golia E. et al. The role of von Willebrand factor in vascular inflammation: from pathogenesis to targeted therapy // Hindawi Mediators of Inflammation. — Vol. 2017. Article ID 5620314.

REFERENCES

1. Iba T., Warkentin T.E, Thachil J. et al. Proposal of the Definition for COVID-19-Associated Coagulopathy. J. Clin. Med, 2021, vol. 10 (2), p. 191. DOI: 10.3390/jcm10020191
2. Makatsariya A.D., Slukhanchuk E.V., Bitsadze V.O. et al. COVID-19, hemostasis disorders and the risk of thrombotic complications. Vestnik RAMN, 2020, vol. 57, no. 4, pp. 306–317 (in Russ.).
3. Chen W., Pan J.Y. Anatomical and pathological observation and analysis of SARS and COVID-19: microthrombosis is the main cause of death. Biol. Proc. Online, 2021, vol. 23, pp. 1–12. DOI: 10.1186/s12575-021-00142-y
4. Khismatullin R.R., Ivaeva R.A., Abdullaeva Sh. et al. Pathomorphological manifestations of inflammatory microthrombosis in COVID-19. Kazanskiy meditsinskiy zhurnal, 2022, vol. 103, no. 4, pp. 575–587 (in Russ.).
5. Fodor A., Tiperciuc B., Login C. et al. Endothelial dysfunction, inflammation, and oxidative stress in COVID-19 — mechanisms and therapeutic targets. OMCL, 2021. Article ID 8671713.
6. Ladikou E.E., Sivaloganathan H., Milne K.M. et al. Von Willebrand factor (vWF): marker of endothelial damage and thrombotic risk in COVID-19? Clin. Med. (Lond), 2020, vol. 20 (5), pp. e178–182. DOI: 10.7861/clinmed.2020-0346
7. Andrianto A., Rizkiawan R., Harsoyo P.M. et al. COVID-19 and endothelial dysfunction: biomarkers and potential drug mechanismsct. Indonesian J. Trop. Infect. Dis, 2021, vol. 9 (2), pp. 108–119. DOI: 10.20473/ijtid.v9i2.25489
8. Watanabe-Kusunoki K., Nakazawa D., Ishizu A. et al. Thrombomodulin as a physiological modulator of intravascular injury. Front. Immunol, 2020, vol. 11, 575890. DOI: 10.3389/fimmu.2020.575890
9. Pons S., Fodil S., Azoulay E. et al. The vascular endothelium: The cornerstone of organ dysfunction in severe SARS-CoV-2 infection. Crit. Care, 2020, vol. 24, p. 353. DOI: 10.1186/s13054-020-03062-7
10. Tvaroška I., Selvaraj C., Koˇca J. Selectins-the two Dr. Jekyll and Mr. Hyde faces of adhesion molecules — a review. Molecules, 2020, vol. 19, p. 2835.
11. Watany M.M., Abdou S., Elkolaly R. et al. Evaluation of admission levels of P, E and L selectins as predictors for thrombosis in hospitalized COVID 19 patients. Clin. Exp. Med, 2022, vol. 22, pp. 567–575. DOI: 10.1007/s10238-021-00787-9
12. Goshua G., Pine A.B., Meizlish M.L. et al. Endotheliopathy in COVID-19-associated coagulopathy: Evidence from a single-centre, cross-sectional study. Lancet Haematol, 2020, vol. 7 (8), pp. 575–582. doi: 10.1016/S2352-3026(20)30216-7.
13. Fenyves B.G., Mehta A., Kays K.R. et al. Plasma P-selectin is an early marker of thromboembolism in COVID-19. Am. J. Hematol, 2021, vol. 96 (12), pp. E468–471. DOI: 10.1002/ajh.26372
14. Agrati C., Sacchi A., Tartaglia E. et al. The role of P-Selectin in COVID-19 coagulopathy: an updated review. Int. J. Mol. Sci, 2021, vol. 22 (15), pp. 7942. DOI: 10.3390/ijms22157942
15. Middleton E.A., He X.-Y., Denorme F. et al. Neutrophil extracellular traps contribute to immunothrombosis in COVID-19 acute respiratory distress syndrome. Blood, 2020, vol. 136 (10), pp. 1169–1179. DOI: 10.1182/blood.2020007008
16. Wang Z.F., Su F., Lin X.J. et al. Serum D-dimer changes and prognostic implication in 2009 novel influenza A(H1N1). Thromb. Res, 2011, vol. 127 (3), pp. 198–201. DOI: 10.1016/j.thromres.2010.11.032
17. Klok F.A., Kruip M., van der Meer N.J.M. et al. Incidence of thrombotic complications in critically ill ICU patients with COVID-19. Thromb. Res, 2020, vol. 191, pp. 145–147. DOI: 10.1016/j.thromres.2020.04.013
18. Li Y., Deng Y., Ye L. et al. Clinical significance of plasma D-dimer in COVID-19 mortality. Front. Med, 2021, vol. 8, 638097. DOI: 10.3389/fmed.2021.638097
19. Lobastov K.V., Schastlivtsev I.V., Porembskaya O.Ya. et al. COVID-19-associated coagulopathy: review of modern recommendations for diagnosis, treatment and prevention. Ambulatornaya khirurgiya, 2020, no. 3–4, pp. 36–51 (in Russ.). DOI: 10.21518/1995-1477-2020-3-4-36-51
20. Tang N., Li D., Wang X. et al. Abnormal coagulation parameters are associated with poor prognosis in patients with novel coronavirus pneumonia. J. Thromb. Haemost, 2020, vol. 18 (4), pp. 844–847. DOI: 10.1111/jth.14768
21. Khaertynov Kh.S., Anokhin V.A. Khaliullina S.V et al. Inflammation and hemostasis in patients with severe form of coronavirus infection COVID-19. Meditsinskiy vestnik Bashkortostana, 2023, vol. 18, no. 4, pp. 11–17 (in Russ.).
22. Sayyadi M., Hassani S., Shams M. et al. Status of major hemostatic components in the setting of COVID 19: the effect on endothelium, platelets, coagulation factors, fibrinolytic system, and complement. Ann. Hematol, 2023, vol. 102 (6), pp. 1307–1322. DOI: 10.1007/s00277-023-05234-1
23. Zheng X.L. ADAMTS13 and von Willebrand factor in thrombotic thrombocytopenic purpura. Annu. Rev. Med, 2015, vol. 66, pp. 211–225. DOI: 10.1146/annurev-med-061813-013241
24. Fujikawa K., Suzuki H., McMullen B. et al. Purification of human von Willebrand factor-cleaving protease and its identification as a new member of the metalloproteinase family. Blood, 2001, vol. 98 (6), pp. 1662–1666. DOI: 10.1182/blood.V98.6.1662.
25. Hafez W., Ziade M.A., Arya A. et al. Reduced ADAMTS13 activity in correlation with pathophysiology, severity, and outcome of COVID-19: a retrospective observational study. Int. J. Infect. Dis, 2022, vol. 117, pp. 334–344. DOI: 10.1016/j.ijid.2022.02.019
26. Doevelaar A.A.N., Bachmann M., Hölzer B. et al. Von Willebrand factor multimer formation contributes to immunothrombosis in coronavirus disease 2019. Crit. Care Med, 2021, vol. 49 (5), pp. E512–520. DOI: 10.1097/CCM.0000000000004918
27. Akin’shina S.V., Bitsadze V.O., Andreeva M.D., Makatsariya A.D. Thrombotic microangiopathy. Prakticheskaya meditsina, 2013, vol. 76, no. 7, pp. 7–19 (in Russ.).
28. Wibowo A., Pranata R., Lim M.A. et al. Endotheliopathy marked by high von Willebrand factor (vWF) antigen in COVID-19 is associated with poor outcome: a systematic review and meta-analysis. Int. J. Infect. Dis, 2022, vol. 117, pp. 267–273. DOI: 10.1016/j.ijid.2021.06.051
29. Watanabe-Kusunoki K., Nakazawa D., Ishizu A. and Atsumi T. Thrombomodulin as a Physiological Modulator of Intravascular Injury. Front. Immunol, 2020, vol. 11, 575890. DOI: 10.3389/fimmu.2020.575890
30. Francischettia I.M.B., Toomera K., Zhang Y. et al. Upregulation of pulmonary tissue factor, loss of thrombomodulin and immunothrombosis in SARS-CoV-2 infection. EClinical Medicine, 2021, vol. 39, 101069. DOI: 10.1016/j.eclinm.2021.101069.
31. Yamaoka-Tojo M. Vascular endothelial glycocalyx damage in COVID-19. Int. J. Mol. Sci, 2020, vol. 21 (24), p. 9712. DOI: 10.3390/ijms21249712
32. Helms J., Tacquard C., Severac F. et al. igh risk of thrombosis in patients with severe SARS-CoV-2 infection: A multicenter prospective cohort study. Int. Care Med, 2020, vol. 46, pp. 1089–1098. DOI: 10.1007/s00134-020-06062-x
33. Gragnano F., Sperlongano S., Golia E. et al. The role of von Willebrand factor in vascular inflammation: from pathogenesis to targeted therapy. Hindawi Mediators of Inflammation, vol. 2017. Article ID 5620314.